换一批
换一批小鼠胚胎干细胞来源的神经干细胞的稳定传代体系探索
Stable maintaining and propagation of mouse embryonic stem cells-derived neural stem cells in vitro
摘要目的 探讨体外诱导、获取均一的神经干细胞群(NSCs)的有效方法,并建立神经干细胞体外稳定传代扩增体系.方法 首先采用无血清的诱导培养基贴壁诱导mESCs形成神经上皮祖细胞(NPCs).然后将经添加表皮生长因子(EGF)和成纤维细胞生长因子-2(FGF2)的无血清培养基短暂悬浮培养后的NPCs再贴壁培养,诱导形成NSCs.通过细胞系46C监测NPCs的形成,同时对分化细胞进行定量PCR和免疫荧光染色,在不同水平检测细胞分化效果.结果 mESCs神经诱导5 d出现大量Soxl+的NPCs；NPCs悬浮培养后,进一步诱导可得到形态均一的NSCs.第2代和第6代NSCs的神经干细胞标志定量PCR检测结果为:Pax6、Nestin、Mashl、BLBP高表达.第8代NSCs免疫荧光染色显示90％以上的细胞均为Nestin、RC2和Pax6阳性.结论 成功诱导mESC生成神经干细胞群,并且可以在体外连续稳定的传代.
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主题词
神经干细胞(Neural Stem Cells)上皮(Epithelium)干细胞(Stem Cells)小鼠胚胎干细胞(Mouse Embryonic Stem Cells)胚胎干细胞(Embryonic Stem Cells)
分类号
R394.2
栏目名称
发布时间
2012-09-20
基金项目
国家自然科学基金（30830052）
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