换一批
换一批B7-H1启动子荧光素酶报告基因载体的构建及活性检测
Construction of luciferase reporter gene vectors containing B7-H1 promoter region and promoter activity assay
摘要目的 构建含B7-H1启动子的荧光素酶报告基因载体,转染肝癌HepG2细胞进行活性检测.方法 PCR扩增B7-H1启动子上游区域基因片段,并插入到含有荧光素酶报告基因的载体PGL3-Basic中构建重组子,经双酶切和测序鉴定后,将重组子转染HepG2细胞,用双荧光素酶报告基因检测系统检测荧光素酶表达活性.结果 成功地构建了6种不同长度的PGL3-B7-H1-Luc荧光素酶表达质粒,分别命名为P88、P175、P203、P398、P723和P960.瞬时转染HepG2后经报告基因检测,P175、P203、P398、P723和P960所含5段启动子均具有转录活性,IFN-y作用后启动子活性明显增强,而P88转染组IFN-y作用后,荧光素酶活性无显著变化.结论 成功构建了B7-H1启动子的荧光素酶报告基因载体.
更多相关知识
- 浏览260
- 被引3
- 下载57
相似文献
- 中文期刊
- 外文期刊
- 学位论文
- 会议论文
