调控Nampt对糖尿病肾病肾小球细胞表达波形蛋白的影响
Effect of regulating Nampt on vimentin expression in glomerular cells in diabetic nephropathy
摘要目的 探讨肾小球细胞内源性Nampt对波形蛋白(vimentin)表达的影响和作用机制.方法 用C57/BL6糖尿病肾病(DN)小鼠肾脏组织经包埋、固定、切片,经免疫共聚焦技术分析内源性Nampt和vimentin蛋白的表达和定位关系;在200 mmol/L葡萄糖(高糖)培养肾小球膜HBZY-1细胞至第5d时,分别用10 μmol/L FK866和1 mmol/LNMN干预,通过免疫荧光和免疫印迹方法检测内源性Nampt对NF-κB、Sirt1和vimentin表达;按高糖不同培养时间(24、48、72、96、120和144h)分组,检测细胞Nampt、NF-κB和Sirt1表达时间效应关系.结果 1)DN组小鼠肾小球明显萎缩,肾小球细胞内Nampt、vimentin蛋白表达明显增加(P<0.01);2)应用FK866处理细胞,vimentin表达明显减少(P<0.01);用NMN干预后,vimentin表达同样低于相应对照组(P<0.01);3)随高糖培养细胞时间延长,Nampt和NF-κB表达明显增加(P<0.01),相反Sirt1表达减少(P<0.01).结论 在DN肾小球纤维化中,Nampt能够通过增强NF-κB和抑制Sirt1信号途径,影响肾小球内vimentin蛋白表达.
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