换一批GDF-5和Dex通过Wnt/β-catenin信号通路促进rBMSCs体外成软骨分化
GDF-5 and Dex promote cartilage differentiation of rBMSCs via Wnt/β-catenin signaling pathway
摘要目的 利用生长分化因子(GDF-5)联合地塞米松(Dex)诱导大鼠BMSCs成软骨分化,并探讨Wnt/β-catenin 信号通路在其中的作用.方法 用全骨髓贴壁法分离培养SD大鼠BMSCs,取P3代细胞随机分成6组:BMSCs组、BMSCs+ Dex组、BMSCs+ GDF-5组、BMSCs+ GDF-5+ Dex组、BMSCs+GDF-5+Dex+ SB216763组和BMSCs+GDF-5+ Dex+XAV-939组.连续诱导培养14 d,倒置相差显微镜观察细胞形态,Alcian blue染色检测细胞的蛋白聚糖,RT-PCR检测成软骨分化相关基因aggrecan、Col2、Sox9、Col1,Wnt/β-catenin信号通路相关基因Dvl1、Gsk3β、β-catenin mRNA表达,Western blot检测Ⅱ型胶原蛋白和β-catenin蛋白表达.结果 与BMSCs组相比,BMSCs+GDF-5+ Dex组能够使诱导的细胞蛋白聚糖分泌明显增加;Aggrecan、C012、Sox9基因表达明显增加(P＜0.05);Ⅱ型胶原蛋白表达增加(P＜0.05);β-catenin mRNA及蛋白表达水平也增加(P＜0.05).与BMSCs+ GDF-5+ Dex组相比,添加SB216763组蛋白聚糖,Ⅱ型胶原基因和蛋白表达增加(P＜0.05);相反,添加XAV-939组相应的成软骨分化基因及蛋白表达下降(P＜0.05).结论 GDF-5联合地塞米松(Dex)可诱导大鼠BMSCs成软骨分化,Wnt/β-cate-nin信号通路可能在其中发挥促进作用.
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分类号
R318.08（医用一般科学）
栏目名称
DOI
10.3969/j.issn.1001-6325.2016.12.003
发布时间
2017-01-07（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
国家自然科学基金（81160226）
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