抗小鼠移码因子1蛋白多抗制备及其在脂肪细胞分化中的表达
Preparation of antibody against mouse UPF1 and the expression of UPF1 in adipose cell differentiation
摘要目的 制备小鼠上游移码因子1(UPF1)蛋白多克隆抗体并探讨脂肪细胞分化过程中UPF1蛋白的表达.方法 构建UPF1蛋白表达载体,制备并纯化兔抗小鼠UPF1抗体;诱导3T3-L1细胞分化,并用免疫共沉淀(CoIP)方法观察脂肪细胞分化过程中UPF1蛋白的表达.结果 1)制备了效价≥64万且与重组mUPF1蛋白和天然mUPF1蛋白均有很强的特异性结合能力的兔抗小鼠UPF1的多克隆抗体;2)小鼠3T3-L1细胞成脂诱导过程中UPF1蛋白表达量未发生明显变化;3)脂肪细胞分化过程中UPF1蛋白与UPF2蛋白相互作用增加.结论 1)以mUPF1蛋白C端550个氨基酸为抗原制备的抗体能够有效识别mUPF1蛋白;2)在脂肪细胞分化过程中UPF1蛋白与UPF2蛋白互作增强.
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