换一批HPV31 L1 C端截短基因可在昆虫细胞表达体系中高水平制备L1 VLP疫苗
A C-terminal truncated HPV31 L1 gene can be used to produce L1 VLP vaccine in baculovirus system with high yield and good immunogenicity
摘要目的 利用昆虫细胞表达体系制备人乳头瘤病毒(HPV)31 L1病毒样颗粒(VLP)疫苗.方法 化学合成法获得昆虫Sf9细胞偏性密码子优化的、C端删除27个氨基酸编码序列的HPV31 L1截短基因( HPV31 L1MΔC),构建重组杆状病毒,感染Sf9细胞进行表达;分别采用超声破碎、含离子型表面活性剂(1% SDS等)或含非离子型表面活性剂(0. 5% TritonX-100)的裂解缓冲液,制备细胞裂解上清;氯化铯超速离心法纯化后经动态光散射及透射电子显微镜鉴定;0. 1 μg的HPV31 L1MΔC VLP于第0和2周肌肉免疫BALB/c小鼠,第4周采集血清分析中和活性.结果 3种裂解方法制备的上清均显示HPV31 L1MΔC蛋白的特异表达,其表达量约占裂解上清总蛋白的10%;采用非离子型表面活性剂获得的裂解上清纯化后,目的蛋白纯度高,产量达11. 5 mg/L;纯化蛋白的水化分子直径为103. 3 nm,均一性好;电镜分析为直径50~60 nm的VLP.免疫血清中HPV31中和抗体滴度为1 440.结论 HPV31 L1MΔC在昆虫细胞表达体系制备的VLP产量高、免疫原性好,可用于生产含HPV31 L1 VLP的多价疫苗.
更多相关知识
分类号
R392（医学免疫学）
栏目名称
DOI
10.3969/j.issn.1001-6325.2019.03.009
发布时间
2019-04-03（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
- 浏览157
- 被引2
- 下载8
相似文献
- 中文期刊
- 外文期刊
- 学位论文
- 会议论文
