二氢杨梅素对实验性结肠炎小鼠调节性B细胞的影响

Effect of dihydromyricetin on regulatory B cells in experimental colitis mice

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摘要目的探讨二氢杨梅素(DHM)对实验性结肠炎小鼠的作用及其对调节性B细胞(Breg)的影响.方法将小鼠随机分为正常组、DSS(葡聚糖硫酸钠)组、DSS+DHM组、DSS+mesalazine组(造模采用4％DSS连续饮用7 d).7 d后,每天分别给予灌胃水(0.2 mL/d)、DHM(40 mg/kg·d)和美沙拉嗪(520 mg/kg·d),连续灌胃7 d,记录小鼠每天疾病活动性指数(DAI),第14天脱颈处死小鼠,记录结肠长度,结肠组织切片行HE染色;流式细胞测量术检测脾脏单细胞悬液中CD19+B淋巴细胞和调节性B细胞(CD19+CD5+CD1d+);RT-qPCR检测脾脏细胞中IL-10、TGF-β、IL-6和IFN-γ的mRNA水平;CCK8法检测脾脏细胞增殖.选择DHM(40μmol/L)作用脾脏细胞悬液24 h,流式细胞测量术检测Breg(CD19+CD5+CD1d+)细胞.结果与对照组比较,DSS组DAI评分、病理学评分(炎症严重程度、炎症程度、隐窝损伤等)显著升高,结肠长度明显缩短(P<0.05);脾脏中CD19+及Breg细胞比例明显降低(P<0.05);炎性因子显著升高(P<0.05);抗炎因子明显降低(P<0.05);与DSS组比较,DSS+DHM组、DSS+Mesala-zine组能明显逆转上述情况(P<0.05);在体外实验中,与对照组相比,经不同浓度DHM干预后,脾脏细胞增殖明显,Breg细胞比例明显增加(P<0.05).结论 DHM对小鼠结肠炎具有明显的治疗作用,可能与促进调节性B细胞增殖及降低抗炎因子IL-10和TGF-β有关.