换一批
换一批肠上皮Depdc5/mTORC1信号轴调控小鼠小肠上皮稳态
Gut epithelial Depdc5/mTORC1 signaling axis regulates mouse intestinal epithelial homeostasis
摘要目的 探讨Depdc5敲除介导的mTORC1信号通路持续激活对小鼠肠道上皮稳态的调控作用.方法 将小鼠分为4组,Depdc5flox flox组(对照组)、Depdc5flox/flox:Villin-Cre组(IKO组)、rapamycin-Depdc5flox/flox组(rap-Ctrl组)、rapa-mycin-Depdc5flox/flox:Villin-Cre组(rap-IKO组),每组各5只.Western blot检测肠道上皮DEPDC5蛋白表达及mTORC1下游分子S6的磷酸化(PS6)水平.RT-qPCR检测小肠组织中不同类型细胞标记基因Dclk1、Trpm5、Muc2 mRNA的表达.苏木精-伊红染色(HE染色)对组织形态学进行检查.免疫组化染色(IHC)检测簇细胞、潘氏细胞、增殖细胞的数目.阿尔新蓝染色法检测杯状细胞的数目.结果 IKO组小鼠小肠和结肠组织中PS6蛋白表达为0.957±0.028高于对照组的0.598±0.041(P<0.05),并且IKO组小鼠小肠上皮不同类型细胞标记基因Dclk1、Trpm5、Muc2的mRNA均低于对照组(P<0.05).此外,IKO组小鼠小肠中簇细胞、潘氏细胞、杯状细胞的细胞数目显著低于对照组,隐窝深度显著高于对照组(P<0.05),增殖细胞显著高于对照组(P<0.05).结论 mTORC1过度激活抑制肠道上皮细胞(IECs)的分化,破坏小鼠肠上皮细胞稳态.
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