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CircRERE调节miR-128-3p/WEE1轴促进人多发性骨髓瘤细胞系增殖、迁移和侵袭

CircRERE promotes proliferation,migration and invasion of human multiple myeloma cell lines by regulating miR-128-3p/WEE1 axis

摘要目的 探究环状RNA RERE(circRERE)调节微小RNA(miR)-128-3p/丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(WEE1)轴对人多发性骨髓瘤(MM)细胞系增殖、迁移和侵袭的影响.方法 体外培养从健康受试者外周血中分离的正常浆细胞(nPCs)和人MM细胞系(U266、RPMI-8226、NCI-H929、LP-1).RT-qPCR检测circRERE、miR-128-3p表达;Western blot检测WEE1 表达.转染RPMI-8226 细胞后,将其分为对照组(control)(未进行转染)、sh-circRERE组、sh-NC组、miR-128-3p inhibitor组、inhibitor-NC组、sh-circRERE+inhibitor-NC组、sh-circRERE+miR-128-3p inhibitor组,噻唑蓝(MTT)实验和 5-乙炔基-2'脱氧尿嘧啶核苷(EdU)免疫荧光染色检测细胞增殖;划痕愈合实验、Transwell小室法检测细胞迁移、侵袭;双荧光素酶报告基因实验证实miR-128-3p与circRERE或WEE1 的靶向作用关系.结果 与nPCs比较,MM 细胞(RPMI-8226、U266、NCI-H929、LP-1)中 circRERE、WEE1 表达增加,miR-128-3p 表达减少(P<0.05);与对照组比较,sh-circRERE组RPMI-8226 细胞增殖率、EdU阳性细胞比例、划痕面积愈合率、侵袭数均减少(P<0.05),miR-128-3p inhibitor组则相反(P<0.05);miR-128-3p inhibitor降低了sh-circRERE对RPMI-8226 细胞增殖、迁移、侵袭的影响(P<0.05).双荧光素酶实验显示circRERE/miR-128-3p、miR-128-3p/WEE1 存在靶向作用关系.结论 CircRERE能够促进RPMI-8226 细胞增殖、迁移和侵袭,可能通过对miR-128-3p发挥海绵效应以增加WEE1 表达而实现.

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