换一批C12ORF66对MYCN扩增的高危神经母细胞瘤细胞的活性调控
Regulatory effect of C12ORF66 on viability of MYCN amplified high-risk neuroblastoma cells
摘要目的 探究 12 号染色体开放阅读框 66(C12ORF66)对MYCN扩增神经母细胞瘤(NB)细胞系活性的调控效应.方法 通过 R2 数据库 GSE16476 和 GSE49710 数据集,分析 MYCN 扩增和 MYCN 非扩增 NB 细胞中C12ORF66 表达量,以及C12ORF66 表达量与患儿预后的相关性.RT-qRCR检测正常组织永生化细胞系、MYCN扩增及MYCN非扩增细胞系中C12ORF66 mRNA表达差异.构建瞬时敲低和稳定敲低C12ORF66 的MYCN扩增细胞株,对照组和敲低组细胞进行实时无标记动态细胞分析(RTCA)、集落形成能力检测及Ki67 免疫荧光染色.结果 R2 数据库分析显示MYCN扩增NB患儿样本中C12ORF66 表达显著高于MYCN非扩增NB患儿样本,并且C12ORF66 表达与患儿预后负相关(P＜0.05).细胞实验表明,与MYCN非扩增细胞系CHLA-255 和SH-SY5Y相比,C12ORF66 在MYCN扩增细胞系 BE(2)-C和 SK-N-BE(2)中表达显著升高(P＜0.001).瞬时或稳定敲低C12ORF66,MYCN扩增NB细胞增殖显著减缓(P＜0.001),集落形成能力显著降低(P＜0.001),Ki67 阳性细胞比例显著减少(P＜0.05).结论 C12ORF66 在MYCN扩增NB患儿样本和细胞系中高表达,且与患儿预后负相关,敲低C12ORF66 显著抑制NB细胞活性.
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关键词
12号染色体开放阅读框66SK-N-BE(2)细胞MYCN扩增细胞增殖chromosome 12 open reading frame 66SK-N-BE(2)cellMYCN amplifiedcell proliferation
分类号
R739.43（神经系肿瘤）
栏目名称
DOI
10.16352/j.issn.1001-6325.2024.03.0288
发布时间
2024-03-27（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
国家自然科学基金（82141118,82293660/82293665）
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