应用微量蛋白质定量分析评估临床样本炎性反应状态

Quantitative analysis of trace-level proteins for assessing inflammation through clinical sampling

二维码有效期 120s

摘要目的比较实时荧光定量PCR(qPCR)和微量蛋白质定量分析方法在乳腺癌患者外周血单核细胞中炎性相关因子caspase-1和IL-1β表达检测中的效果差异.方法收集10例乳腺癌患者的术前、术后2 h配对外周血样本各约6 mL,分离出外周血单核细胞并通过脂多糖活化;分别用qPCR和微量蛋白质定量分析方法,检测caspase-1和IL-1β在单核细胞中的mRNA和蛋白质表达水平,并使用了 β-actin进行了数据归一化,比较两种检测方法结果的异同,并评估其优缺点.结果绝大部分患者经过手术应激后外周血单核细胞数量明显增加.在mRNA水平上,与术前相比,术后caspase-1和IL-1β在50％(5/10)和40％(4/10)的患者中呈现升高趋势,其余表现为降低(分别为40％和50％)或改变甚微无统计学意义(均为10％).而微量蛋白质定量分析结果显示,与术前相比,术后caspase-1和IL-1β蛋白在60％(6/10)和60％(6/10)的患者中呈现升高趋势,其余表现为降低(分别为30％和20％)或改变较小无统计学意义(分别为10％和20％),且80％的患者在术后出现了明显增加的caspase-1和IL-1β活性切割电泳条带.重要的是,有30％和 40％的患者手术前后caspase-1和IL-1β mRNA和蛋白质水平变化不一致.结论微量蛋白质定量分析方法具有样本用量少、灵敏度高、重复性好、操作相对简单等优点,更适于临床样本的炎性反应状态评估.