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白内障相关人γD晶状体蛋白的热诱导变性

Heat-induced denaturation of cataract-related human γ D-crystallin

摘要目的 揭示人γD晶状体蛋白(HGD)与先天性白内障相关突变体蛋白(HGD P23T)的热诱导变性效应,对比野生型与突变体蛋白质在加热过程中结构变化的差异性.方法 体外表达纯化HGD与HGD P23T,测定蛋白质内源性荧光强度和静态光散射光强随温度的变化,揭示HGD与HGD P23T依赖于温度的折叠与聚集结构变化规律.结果 温度低于 70℃时,HGD与HGD P23T的内源荧光质心波长随温度升高向长波长移动,荧光强度降低,蛋白质构象去折叠.HGD P23T比HGD的构象稳定性差.温度高于 70℃时,静态光散射强度随温度显著上升,蛋白质受热聚集.相对于野生型,HGD P23T表现出更强的聚集趋势.结论 加热破坏γD晶状体蛋白的折叠构象,诱导去折叠态蛋白质发生聚集.疾病相关P23T突变显著降低了γD晶状体蛋白的构象稳定性.

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