换一批可溶性流感病毒B/Victoria系血凝素重组蛋白的筛选
Screening of soluble hemagglutinin recombinant proteins for influenza virus B/Victoria
摘要目的 筛选可溶性表达且具有血凝活性的流感毒株的 B/Victoria 系血凝素(HA)重组蛋白.方法 以B/Darwin/7/2019(B/Victoria)毒株为基础,在HA胞外区C端分别融合亮氨酸拉链GCN4pII和GCN4pLL三聚化基序(T1 和T2)、T4 噬菌体Foldon的三聚化基序(T3).获得HA突变体基因BV-T1、BV-T2 和BV-T3,同时构建HA胞外区突变体基因BV-ecto作对照组,插入pFastBac1 载体,利用杆状病毒-Sf9 细胞表达体系,表达HA突变体蛋白,收获感染细胞培养上清.采用Strep-Tactin亲和层析纯化,对HA突变体纯化蛋白的寡聚化和血凝活性进行鉴定.结果 4 种HA突变体蛋白均在上清中获得可溶性表达;BV-T2 和BV-T3 的三聚化程度很高,BV-T1 以三聚化为主,存在少量的低聚化,BV-ecto以单体存在;BV-T1 和BV-T2 有血凝活性,而BV-T3 和BV-ecto无血凝活性.结论 可溶性表达的BV-T2 HA突变体蛋白三聚化程度好,且具有血凝活性.亮氨酸拉链三聚化基序 GCN4pLL 可用于B/Victoria系HA重组蛋白的可溶性表达,为可溶性B/Victoria系HA重组蛋白疫苗的研发提供参考.
更多相关知识
栏目名称
DOI
10.16352/j.issn.1001-6325.2026.01.0092
发布时间
2026-01-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
中国医学科学院医学与健康科技创新工程项目（2021-I2M-1-043）
- 浏览4
- 被引0
- 下载1
相似文献
- 中文期刊
- 外文期刊
- 学位论文
- 会议论文
