过表达Vps16改善心肌缺血/再灌注大鼠心肌功能
Over-expression of Vps16 improves myocardial function in rats with myocardial ischemia-reperfusion
摘要目的 探究自噬调节因子空泡分选蛋白 16(Vps16)在大鼠心肌缺血/再灌注(MI/R)损伤中的作用.方法 将大鼠随机分为Sham组、MI/R组、慢病毒空白载体(Lv-NC)组和慢病毒过表达Vps16(Lv-Vps16)组,n=6.超声心动图检测大鼠左心室功能[左室舒张内径(LVIDd)和左室收缩内径(LVISd),得到左室缩短分数(LVFS)、左室射血分数(LVEF)].ELISA检测血清心肌损伤标志物[肌酸激酶同工酶(CK-MB)、肌钙蛋白Ⅰ(cTnⅠ)和乳酸脱氢酶(LDH)]水平及炎性因子[白介素 6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素 1β(IL-1β)].采用HE及TUNEL染色评估心肌损伤与凋亡,并以IHC和Western blot测定Vps16、紫外线辐射抗性相关基因蛋白(UVRAG)、Ras相关蛋白 7(Rab7)和自噬蛋白表达.结果 与Sham组比较,MI/R组大鼠LVIDd、LVISd、CK-MB、cTnⅠ和LDH水平及TUNEL阳性细胞率及IL-6、TNF-a、IL-1β、p62 水平升高,LVFS、LVEF及Vps16、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ、UVRAG、Rab7 蛋白下调(P<0.05).且MI/R组大鼠心肌组织结构紊乱,提示MI/R模型构建成功.而过表达Vps16 缓解心肌损伤和炎性反应,改善大鼠心功能.结论 Vps16 激活UVRAG/Rab7 诱导心肌细胞自噬缓解MI/R损伤.
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