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DiI标记微血管可视化方法的建立及其在小鼠肠型急性放射病研究中的应用

ESTABLISHMENT OF DiI LABELING METHOD FOR VISUALIZING MICROVASCULAR CHANGE AND ITS APPLICATION TO INTESTINAL FORM OF ACUTE RADIATION SICKNESS IN MICE

摘要目的 建立荧光染料DiI心脏灌注标记血管的方法,用于观察小鼠小肠绒毛微血管结构在肠型急性放射病(IF-ARS)发生、发展中的变化,以期为IF-ARS的发病机制研究提供一种可行方法.方法 60Coγ线腹部局部照射C57BL/6小鼠建立肠型急性放射病动物模型;H.E染色观察照射小鼠小肠黏膜损伤;应用荧光染料DiI小鼠心脏灌注法标记血管,荧光显微镜和激光共聚焦显微镜下观察小鼠小肠绒毛微血管结构及其在照射后的变化.结果 17.5 Gy腹部局部照射的C57BL/6小鼠在照后第5天很少发现再生绒毛和隐窝,已达到肠型急性放射病的损伤程度.成功建立了DiI心脏灌注标记血管方法,在对照组可观察到完整且清晰的小鼠小肠绒毛微血管三维结构,而在照射组发现照后24 h和48 h内小肠绒毛微血管相继出现舒张、渗出的损伤改变,照后3~5d以微血管网充盈不良甚至脱落为主要表现.结论 成功建立了DiI标记的小鼠小肠绒毛微血管可视化的方法,且将其初步应用于观察小鼠小肠绒毛结构及其在肠型急性放射病发生、发展中的变化是可行的.

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