换一批RNA干扰组蛋白去乙酰化酶1对人胰腺癌细胞增殖、凋亡的调控机制研究
Mechanism of RNA interference on proliferation and apoptosis regulation of pancreatic cancer cell line PaTu8988 by HDAC1 siRNA
摘要目的 观察沉默组蛋白去乙酰化酶1(HDAC1)基因对人胰腺癌PaTu8988细胞增殖、凋亡的影响及可能机制.方法 胰腺癌PaTu8988细胞株分为空白对照组(不予任何处理)、阴性对照siRNA组(予以30nmol/L阴性siRNA)、siRNA1组(予以15nmol/L HDAC1 siRNA)和siRNA2组(予以30nmol/L HDAC1 siRNA).siRNA转染48h后,用相对实时定量RT-PCR法和Western blotting检测HDAC1基因表达情况;相对实时定量RT-PCR法检测细胞增殖凋亡相关基因p21、Bcl-2、Bax的表达;WST-8法检测细胞增殖情况;流式细胞术检测细胞凋亡变化.结果 转染HDAC1 siRNA 48h后人胰腺癌PaTu8988细胞中HDAC1 mRNA表达量在siRNA1组和siRNA2组分别为46.1%±6.1%和32.3%±1.4%,均显著低于空白对照组(100.0%±3.4%)和阴性对照siRNA组(87.4%±28.3%,P＜0.05).Western blotting显示HDAC1蛋白表达量亦明显下降,以siRNA2组表达量最低(P＜0.05).WST-8法检测显示4组细胞存活率分别为100%±17.1%、87.1%±5.0%、68.7%±4.7%、61.6%±2.0%,siRNA1组和siRNA2组与其他各组相比差异显著(P＜0.05).流式细胞术检测显示上述4组胰腺癌细胞凋亡率分别为4.20%±0.95%,4.59%±1.26%,10.09%±1.36%,11.19%±6.07%.与空白对照组和阴性对照siRNA组相比,sRNA1组和siRNA2组凋亡率显著增高(P＜0.05).siRNA1组和siSNA2组p21、Bax mRNA相对表达量明显高于其他各组(P＜0.05),而Bcl-2 mRNA相对表达量明显低于其他各组(P＜0.05).结论 HDAC1 siRNA能特异、有效地抑制人胰腺癌PaTu8988细胞HDAC1的表达,同时抑制细胞增殖、诱导细胞凋亡,其机制可能与上调p21、Bax表达,下调Bcl-2表达有关.
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