小檗碱对果糖诱导人肾小管细胞内质网应激PERK凋亡通路的影响

Effect of berberine on endoplasmic reticulum stress PERK apoptosis pathway in HK-2 cells by high fructose

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摘要目的探讨小檗碱对果糖诱导下肾小管上皮细胞凋亡的影响.方法人肾小管上皮细胞株(HK-2细胞)于含10%胎牛血清的DMEM培养基中进行体外培养,然后随机分为正常组(C组)、果糖组(F组,含25mmol/L果糖培养液)、小檗碱组(B组,25mmol/L果糖+10μmol/L小檗碱)和TUDCA组(T组,25mmol/L果糖+2μmol/L TUDCA培养液).培养24h后收集细胞,Western blotting检测葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、CHOP蛋白表达水平及蛋白激酶R样内质网激酶(PERK)、真核启始因子2α(eIF2α)的磷酸化水平,流式细胞仪检测各组细胞周期情况,TUNEL法检测各组细胞凋亡率.结果与C组比较,F组GRP78、CHOP蛋白表达水平上调,同时p-PERK、p-eIF2α水平明显上升(P<0.05);与F组比较,B组、T组GRP78、CHOP、p-PERK、p-eIF2α表达水平均明显下降(P<0.05);T组与B组GRP78、CHOP、p-PERK、p-eIF2α表达水平比较无明显差异.与C组比较,F组HK-2细胞活力明显降低,细胞凋亡指数明显升高(P<0.05);与F组比较,B组和T组肾小管上皮细胞活力明显增加,细胞凋亡指数明显下降(P<0.05);T组B组细胞活力指数、细胞凋亡率比较无明显差异.结论持续采用果糖培养HK-2细胞可激活细胞内PERK通路,引起内质网应激的发生,小檗碱能够抑制果糖诱导的PERK和eIF2α的磷酸化,下调GRP78、CHOP表达,从而调控PERK通路缓解细胞周期阻滞现象,降低细胞凋亡率.

作者张勇 ^[1] 黄春来 ^[1] 付婷婷 ^[1] 陈小青 ^[1] 王丽萍 ^[1] 庄永泽 ^[1] 学术成果认领

作者单位 350025,福州南京军区福州总医院肾脏科 ^[1]

关键词内质网应激肾小管细胞凋亡小檗碱 endoplasmic reticulum stress kidney tubules berberine apoptosis

主题词小檗碱(Berberine)肾小管(Kidney Tubules)果糖(Fructose)细胞(Cells)内质网应激(Endoplasmic Reticulum Stress)

分类号 R589.9

栏目名称 基础研究

DOI 10.11855/j.issn.0577-7402.2017.01.02

发布时间 2017-07-06

基金项目

国家自然科学基金 福建省自然科学基金(2014J01371)This work was supported by the National Natural Science Foundation of China the Natural Science Foundation of Fujian Province