巨噬细胞胆碱能通路对急性缺糖缺氧性肾小管细胞损伤的影响

The cholinergic pathway alleviates acute oxygen and glucose deprivation induced renal tubular cell injury by reducing the secretion of inflammatory medium of macrophages

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摘要目的探讨胆碱能通路对急性缺糖缺氧性肾小管细胞损伤的影响.方法分离培养大鼠肾内巨噬细胞,构建巨噬细胞与肾小管上皮细胞共培养体系及缺糖缺氧(OGD)细胞模型,据处理不同将细胞分为OGD组、乙酰胆碱(ACh 100μmol/L)+OGD组和ACh+加兰他敏(Gal 10μmol/L)+OGD组.采用ELISA法检测各组上清液肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)和IL-10的表达;MTT法检测肾小管细胞活力;RT-qPCR及Western blotting检测胆碱酯酶(AChE)mRNA和蛋白表达;比色法检测AChE活性.结果 ACh+OGD组TNF-α和IL-1β水平均低于OGD组,加入Gal之后,TNF-α和IL-1β水平进一步下降;ACh+OGD组肾小管活力高于OGD组,加入Gal之后,肾小管活力进一步增强,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01).3组之间巨噬细胞AChE mRNA和蛋白表达差异均无统计学意义(P>0.05).与OGD组比较,ACh+OGD组与ACh+Gal+OGD组肾小管细胞活力减弱,但ACh+OGD组与ACh+Gal+OGD组间差异无统计学意义(P=0.368).结论 ACh和Gal可抑制肾脏巨噬细胞分泌炎性介质并抑制胆碱酯酶活性,减轻急性缺氧性肾小管细胞损伤.调控巨噬细胞的胆碱能通路可能是未来急性缺氧性肾损伤的治疗方向.

作者吴明 ^[1] 吴乐锋 ^[1] 陆俊福 ^[1] 李明利 ^[2] 李赟 ^[3] 徐迹 ^[3] 刘文兰 ^[3] 刘芬 ^[4] 冯永文 ^[1] 学术成果认领

作者单位 518035,广东深圳深圳市第二人民医院重症医学科 ^[1] 518035,广东深圳深圳市第二人民医院介入治疗科 ^[2] 518035,广东深圳深圳市第二人民医院中心实验室 ^[3] 330006,南昌南昌大学第一附属医院重症医学科 ^[4]

关键词胆碱能药炎症介导素类肾小管 cholinergic agents inflammation mediators acute kidney injury

主题词肾小管(Kidney Tubules)细胞(Cells)巨噬细胞(Macrophages)低氧(Hypoxia)性(Sex)

分类号 R692

栏目名称 基础研究

DOI 10.11855/j.issn.0577-7402.2017.08.01

发布时间 2017-08-15

基金项目

国家自然科学基金 广东省医学科学技术研究基金 广东省深圳市科技创新委项目 深圳市第二人民医院临床-基础一对一桥梁项目基金(2015-16)This work was supported by the National Natural Science Foundation of China the Medical Science and Technology Research Foundation of Guangdong Shenzhen Science and Technology Planning Project Clinical Doctor-Basic Scientist Combination Foundation of Shenzhen Second People's Hospital