新生期小鼠肺炎链球菌肺炎对气道上皮损伤的影响
Effects of neonatalStreptococcus pneumoniae pneumonia on airway epithelial injury of mice
摘要目的 探讨新生期肺炎链球菌肺炎(S.pp)对气道上皮损伤的影响.方法 生后7 d的C57BL/6小鼠鼻腔内滴注2×105 cfu肺炎链球菌(5μl)建立S.pp模型,对照组滴注等量磷酸盐缓冲液.感染5周后检测两组小鼠的气道高反应性,收集小鼠肺组织,利用实时荧光定量PCR检测CDH1、TJP1 mRNA水平;免疫组织化学、Western blotting检测气道上皮E钙黏蛋白(E-cadherin)、紧密连接蛋白(ZO-1)水平.Masson染色检测小鼠气道上皮下胶原蛋白沉积水平,AB-PAS染色检测小鼠气道杯状细胞数量,HE染色检测小鼠肺组织的炎症改变情况.结果 小鼠雾化吸入乙酰甲胆碱浓度为6.25~50 mg/ml时,S.pp组小鼠的气道高反应性明显高于对照组(P<0.001).S.pp组小鼠肺组织CDH1、TJP1 mRNA水平明显低于对照组(分别为0.85±0.29vs.1.42±0.40,P=0.033;0.43±0.16vs.0.83±0.26,P=0.010),气道上皮细胞E-cadherin、ZO-1的表达水平明显低于对照组(分别为9.66±4.89vs.24.52±7.58,P=0.001;13.54±3.79vs.25.53±5.99,P=0.005),肺组织E-cadherin、ZO-1蛋白水平明显低于对照组(分别为0.23±0.06vs.0.38±0.06,P=0.019;0.68±0.12vs.0.96±0.16,P=0.032),上皮下胶原蛋白沉积与对照组比较明显增加(45.54±5.79vs.26.3±5.53,P=0.001).两组气道杯状细胞数量及肺组织炎症评分差异无统计学意义.结论 S.pp可诱导小鼠气道上皮损伤,参与形成气道高反应性.
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