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利用微束激光穿刺法将菜豆几丁质酶基因导入油菜的研究

Studies on Introduction of Bean Chitinase Gene into Brassica napus via Laser Microbeam Puncture

摘要本文以甘蓝型"双低"油菜新品种H165为实验材料,以子叶柄为外植体,研究了微束激光转化系统中的一些关键因素:如取材时间以播种后4-5天为宜;高渗液预处理20-40分钟者最佳;外源DNA浓度以0.05-0.1μg/μl获得转基因植株最有利等等.已建立一种操作简便,重复性好,并能准确定位于靶体细胞的转化体系.并用这个转化体系成功地将菜豆几丁酶基因导入油菜,并获得转基因植株,经PCR扩增检测为阳性,实验结果表明外源菜豆几丁酶基因确已整合到油菜基因组中.

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