pEGFP-植酸酶基因质粒重组构建及其在COS7细胞中表达分析
Construction of Bacterial Phytase Gene in pEGFP-N3 Vectors and Its Expression in COS7 Cells
摘要采用PCR技术扩增细菌酸性植酸aPPA2基因ORF序列,其DNA分子为1 299 bp,编码432氨基酸,蛋白质分子量约为48 kDa.此植酸酶基因被克隆到pEGFP-N3表达载体的BamH1和Pst1克隆区域,重组的pEGFP-aPPA2重组质粒经转化到哺乳类培养细胞COS7中.重组的pEGFP-N3-aPPA2在COS7细胞中正常表达并检测出高的植酸酶活性.本研究提出的pEGFP-N3-aPPA2重组质粒构建和在哺乳类COS7细胞表达体系为植酸酶生产提供了新的技术线路.
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