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农杆菌介导的玉米原位转化方法改良

A Modified Method of Agrobacterium-Mediated in Planta Transformation of Maize

摘要原位转化是一种简便的植物转基因方法,在拟南芥中已经应用较为成熟,在玉米上的应用并不多见.本文在玉米开花期间,将含有目标载体pCAMBIA1301的农杆菌菌株LBA4404的细胞悬浮液直接涂抹到事先授粉约8小时后并去除掉苞叶和花丝的幼穗上.转化后种子的幼苗,经过gus活性染色和潮霉素基因(hpt)的PCR扩增,证实有部分的种子T-DNA整合进入了基因组.在潮霉素筛选后,有2.6 %抗性苗存活.其中57.7 %抗性植株表现出GUS阳性,相当于全部检测幼苗的1.5 %.这一结果通过潮霉素基因的PCR扩增,得到进一步的证实.

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分类号 Q789
栏目名称 技术研究
DOI 10.3969/j.issn.1007-7146.2009.02.020
发布时间 2009-06-09
基金项目
国家高技术研究发展计划(863计划) The Scientific and Technological Key Program of Ministry of Education
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