银杏内酯B介导IKK/NF-κB通路对肺腺癌A549细胞增殖及凋亡的调控作用
Ginkgolide B Regulates the Proliferation and Apoptosis of Lung Adenocarcinoma A549 Cells Through IKK/NF-κB Pathway
摘要为探究银杏内酯B对人肺腺癌(A549)细胞增殖和凋亡的影响及IκB激酶/核因子κB(IKK/NF-κB)信号通路的调控作用,体外培养A549细胞,将其分为对照组(相同体积二甲基亚砜溶剂)和不同浓度(4、8、16、32 μmol/L)银杏内酯B组,干预24 h,细胞计数试剂盒-8(CCK-8)检测细胞活力筛选最适浓度的银杏内酯B用于后续试验.随后将A549细胞分为对照组、银杏内酯B组(16 μmol/L银杏内酯B)、阳性药物组(0.4 mg/L阿霉素)、抑制剂组(16 μmol/L银杏内酯B+10 μmol/L IKK/NF-κB通路抑制剂BAY11-7082)和激活剂组(16 μmol/L银杏内酯B+1 μmol/L IKK/NF-κB通路激活剂Prostratin),干预24 h.5-乙炔基-2′脱氧尿嘧啶核苷(EdU)测定细胞增殖能力;Hoechst 33258染色试剂盒测定细胞凋亡能力;蛋白免疫印迹法检测细胞周期蛋白D1(CyclinD1)、半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)及IKK/NF-κB通路相关蛋白表达水平.根据CCK-8试验结果,选择16 μmol/L银杏内酯B用于后续试验.与对照组比较,银杏内酯B组和阳性药物组A549细胞增殖率、CyclinD1、p-NF-κB p65/NF-κB p65和p-IκBα/IκBα比值显著降低(P<0.05),凋亡率和Caspase-3蛋白表达水平显著升高(P<0.05);与银杏内酯B组比较,抑制剂组细胞增殖率、CyclinD1、p-NF-κB p65/NF-κB p65和p-IκBα/IκBα比值显著降低(P<0.05),凋亡率和Caspase-3蛋白表达水平显著升高(P<0.05),激活剂组细胞增殖率、CyclinD1、p-NF-κB p65/NF-κB p65和p-IκBα/IκBα比值显著升高(P<0.05),凋亡率和Caspase-3蛋白表达水平显著降低(P<0.05).银杏内酯B能通过调控IKK/NF-κB通路信号转导抑制A549细胞的增殖,并诱导其凋亡.
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