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不同非病毒载体对原代肌腱细胞转染效率和毒性作用研究

Study on the transfection efficiency and toxicity of primary tendon cells by different non-viral vectors

摘要目的:研究并比较非病毒载体纳米球和脂质体对原代肌腱细胞的转染效率以及毒性作用.方法:制备不同N/P比例的PLGA纳米球,原代培养鸡、大鼠、小鼠肌腱细胞,将低、中、高不同剂量的pEGFP-N1 质粒负载于纳米球和脂质体,对三种肌腱细胞进行转染.通过荧光拍照和流式细胞分析,检测质粒在 24、48、72、96 h的转染效率,Western Blot法检测GFP表达水平,CCK8 法检测转染 24、48、72 h细胞活力.结果:对于鸡肌腱细胞,纳米球的转染效率显著高于脂质体,尤其是NP10的GFP表达最明显,且对细胞无毒性作用.对于大鼠肌腱细胞,NP10 的转染效率最佳,其次是NP6 和脂质体,但脂质体降低了细胞活性.对于小鼠肌腱细胞,纳米球和脂质体的转染效率均较低,且随着时间与剂量的增加,细胞毒性作用越来越明显.结论:NP10是鸡和大鼠肌腱细胞转染质粒的最佳试剂,但小鼠肌腱细胞最合适的转染试剂还需进一步探索.

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