换一批基于环介导等温技术检测人甲流H1N1病毒的响应面优化分析
Response surface methodology analysis for detecting human H1N1 in-fluenza virus based on loop-mediated isothermal amplification technology
摘要目的 为了建立人甲型流感H1N1病毒的环介导等温扩增(LAMP)体系,本研究以H1N1病毒核酸扩增效率为指标,通过响应面分析优化探讨LAMP检测H1N1流感病毒的最佳反应条件.方法 根据Box-Benhnken响应设计原理,对影响LAMP反应关键因素(甜菜碱浓度、引物浓度、反应温度)进行三因素三水平响应面法优化.同时选取60例确诊甲流临床核酸样本和60例健康受试者核酸样本,分别采用聚合酶链反应(PCR)技术和LAMP检测技术进行比对评估(评估指标包括灵敏度、特异性、准确度).结果 响应面回归模型能较好地预测LAMP检测效果与甜菜碱浓度、引物浓度和反应温度之间的关系,经过优化LAMP反应体系提高检测灵敏度和缩短反应时间.同时与PCR检测结果相比,LAMP检测实现100％的灵敏度、98.9％的特异性和99.2％的准确度,检测下限可达100 copies/ml.结论 本研究建立的H1N1甲流LAMP检测是一种高效、灵敏、特异性高且不需要复杂设备的检测方法,适用于基层医疗卫生机构或居家自测,对季节性甲流病毒监测及暴发时应急检测具有重要意义.
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关键词
响应面分析法环介导等温扩增甲流H1N1检测即时检测Response surface methodologyLoop-mediated isothermal amplificationInfluenza A H1N1 detectionPoint-of-care test
栏目名称
DOI
10.3969/j.issn.1674-4721.2024.16.028
发布时间
2024-07-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
湖北省武汉东湖高新区光谷人才计划（N480）
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