血管内皮生长因子基因反义核酸设计及其对HL60细胞生长的影响
Antisense drugs targeting with vascular endothelial growth factor mRNA designed by computer aid and inhibitory effects of them on HL60 cells in vitro
摘要目的:用计算机设计筛选出血管内皮生长因子(VEGF)的高效反义核酸;用实验方法研究VEGF反义核酸对HL60细胞生长的影响.方法:用RNAstructure(version 3.7)软件,选择总自由能(Overall △G37)的相对低的反义核酸,共计7条,长度18~20核苷酸,全硫代修饰;细胞培养72h,采用胎盼蓝拒染法观察存活细胞,用ELISA法检测培养液中VEGF蛋白水平,分析反义核酸对HL60细胞的作用.结果:筛选出6条反义药物对HL60细胞生长有明显抑制作用,其中4条优于阳性对照组(A2);A7组细胞生长抑制率达41.74%.培养液中VEGF蛋白表达抑制率达47.81%.Overall△G32与反义核酸活性密切相关(r=-0.842,P<0.01).结论:计算机辅助设计有助于获得更好的反义药物,VEGF反义核酸可抑制HL60细胞生长及VEGF蛋白表达,VEGF可能成为白血病治疗的新靶点.
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