换一批巴斯德毕赤酵母高密度发酵表达rHCMVp的研究
The expression of recombinant human cytomegalovirus peptide in Pichia pastoris in high-density fermentation
摘要目的:提高人巨细胞病毒嵌合肽(rHCMVp)在巴斯德毕赤酵母中的表达量,并进行发酵罐高密度发酵.方法:将生长培养基的菌体离心后等量接入诱导培养基中(包括不同体积分数的甲醇、pH值)培养,通过菌体密度检测和发酵液上清的SDS-PAGE结果分析不同条件、不同诱导时间对人巨细胞病毒嵌合肽表达的影响,并依据优化条件进行高密度发酵.结果:摇瓶培养时,转化子在体积分数1%的甲醇pH 6.0的条件下诱导72 h,A600(菌体密度)为45.2,目的蛋白表达量达到10.2 mg/L.2 L发酵罐进行了高密度发酵,经体积分数1%甲醇诱导48 h,最终A600(菌体密度)达到124,每升发酵液中含目的蛋白57.21 mg.结论:通过条件优化,进行高密度发酵,获得大量的rHCMVp.
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