换一批PML-RARα和hGM-CSF双基因表达载体的构建
Construction of the eukaryotic coexpression plasmid containing PML- RARα gene and human GM- CSF gene
摘要目的:构建急性早幼粒细胞白血病(APL)PML-RARα基因与人粒巨噬细胞集落刺激因子(hGM-CSF)基因真核双表达载体,为利用DNA疫苗治疗APL奠定基础.方法:利用RT-PCR技术从NB4细胞的RNA中扩增出PML-RARα融合点附近的部分基因片段,通过PCR从pORF-hGM-CSF质粒中扩增出hGM-CSF基因,并分别将两基因片段连接到pIRES质粒的多克隆位点(MCS)A和B中,构建真核双表达载体.利用酶切和序列分析方法验证所构建载体的正确性.结果:Nhe I/Mlu I和Xba I/Sal I双酶切证明重组质粒中含有相应大小的PML-RARα基因片段及hGM-CSF基因,且序列分析证明重组质粒中插入片段的碱基序列均完全正确.结论:成功构建了含有PML-RARα基因及hGM-CSF基因的真核双表达载体.
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DOI
10.3969/j.issn.1000-9965.2006.06.002
发布时间
2007-03-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
中-德合作项目（(CHN02/319)）
广东省科技厅科技计划（(2005B50301016)）
广东省广州市科技攻关项目（(2003J1-10011;2005Z1-E4011)）
国务院侨办重点学科建设基金
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