换一批重组大鼠溶菌酶N端多肽的原核表达及其对晚期糖基化终产物的结合作用
Prokaryotic expression of recombinant rat lysozyme N -terminal fragment and its AGEs binding activity
摘要目的:探讨溶菌酶N端多肽片段基因的重组并在原核中表达,研究该片段与晚期糖基化终产物(advanced glycation end products,AGEs)的结合作用.方法:从SD大鼠外周血白细胞中抽提总RNA,经逆转录并扩增大鼠溶菌酶N端基因片段,以质粒pET-30a(+)为载体构建表达质粒pLY77.含pLY77的工程菌Rosetta(DE3)经IPTG诱导,对该重组多肽进行高效表达.表达产物经Ni+-NTA琼脂糖柱层析纯化后,得到的溶菌酶N端多肽片段LY77经SDS-PAGE和Western印迹法鉴定,ELISA法分析体外结合活性.结果:LY77在Rosetta(DE3)中高效表达,主要以可溶性蛋白的形式存在,相对分子质量约为11 000;LY77对体外制备的晚期糖基化蛋白BSA-AGEs具有显著的结合活性.结论:LY77对AGEs具有很高的亲和力,为进一步探讨LY77可能应用于体内促进AGEs的清除和参与免疫调节作用奠定基础.
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DOI
10.3969/j.issn.1000-9965.2006.06.004
发布时间
2007-03-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
教学改革项目（51204004）
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