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Eca109细胞中自噬模型的建立

Eca109 autophagy in the cell model

摘要目的:在食管鳞癌细胞Eca109中建立自噬模型.方法:按照常规细胞培养方法,将pmcherry-GFP-LC3质粒转染进入Eca109细胞,mcherry为红色荧光蛋白,GFP为绿色荧光蛋白,可示踪自噬体形成.加入浓度为50nmoL/L自噬激活剂雷帕霉素,建立自噬模型.采用电镜观察雷帕霉素诱导后细胞中自噬小体的产生,激光共聚焦显微镜观察自噬发展的阶段,并对发生自噬行为的细胞进行计数.结果:雷帕霉素诱导后可见明显的自噬小体,激光共聚焦采图可见自噬细胞数量明显增多(P<0.05).结论:1.在Eca109细胞中通过加入自噬诱导剂雷帕霉素成功构建细胞自噬模型;2.细胞自噬模型的建立为研究肿瘤细胞自噬活动的现象和分子调控机制提供了新的实验平台.

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作者 李晓苗 [1] 刘伊宁 [1] 来雯婷 [1] 吉别克·瓦提别克 [1] 美丽吾尔提·达吾列提汗 [1] 沙亚哈提·别尔克哈之 [1] 王海峰 [2] 李颖 [1] 李惠武 [3] 李卉 [4] 学术成果认领
作者单位 新疆医科大学基础医学院,新疆乌鲁木齐,830011 [1] 新疆医科大学附属肿瘤医院,新疆乌鲁木齐,830011 [2] 新疆医科大学附属肿瘤医院肿瘤研究所,新疆乌鲁木齐,830011 [3] 新疆医科大学中心实验室,新疆乌鲁木齐,830011 [4]
DOI 10.11778/j.jdxb.2016.06.009
发布时间 2017-05-08(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
基金项目
国家自然科学基金(81660459)
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