超临界二氧化碳联用分子蒸馏萃取的艾叶精油成分分析及其生物活性探究
Research on components analysis and biological activity of Artemisia argyi essential oil extracted by supercritical carbon dioxide combined with molecular distillation
摘要目的:分析超临界二氧化碳联用分子蒸馏萃取的艾叶精油化学成分并对其抑菌、抗炎、抑制酪氨酸酶活性进行评价,指导艾叶精油在外用制剂中的应用.方法:通过超临界二氧化碳联用分子蒸馏来萃取艾叶精油;利用气相-质谱联用法(gas chromatography-mass spectrometry,GC-MS)分析艾叶精油的化学成分;采用滤纸片扩散法检测艾叶精油对金黄色葡萄球菌、大肠埃希氏菌、表皮葡萄球菌、绿脓杆菌、白念珠菌等5 株供试菌的抑菌活性,采用微量二倍稀释法检测其最小抑菌浓度(minimum inhibitory concentration,MIC)和最小杀菌浓度(minimum bactericidal concentration,MBC);基于脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的巨噬细胞(RAW264.7 细胞)炎症模型来考察艾叶精油对炎症因子白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)的mRNA表达水平的影响;基于人黑色素瘤细胞(A375 细胞)模型来评价艾叶精油对酪氨酸酶活性和黑色素生成的影响.结果:从艾叶精油中共鉴定出 132 种化合物,其主要成分有 α-松油醇(7.08%)、4-萜烯醇(6.45%)、β-石竹烯(5.83%)、桉油精(4.82%)、右旋龙脑(4.54%)、2-环己烯醇(3.82%)、右旋樟脑(3.09%)、香芹醇(1.49%)、α-侧柏酮(0.75%);艾叶精油对5 株供试菌均表现出明显的抑菌活性,其中对白念珠菌呈高度敏感,对金黄色葡萄球菌、大肠埃希氏菌、表皮葡萄球菌、绿脓杆菌、白念珠菌的MIC分别为1.88、3.75、7.50、15.00、0.94 mg/mL,MBC分别为1.88、7.50、15.00、30.00、1.88 mg/mL;艾叶精油能显著降低 RAW264.7 细胞 IL-1β、IL-6、TNF-α、iNOS 的mRNA表达水平(P<0.05);艾叶精油可显著抑制A375 细胞中酪氨酸酶活性(P<0.05),使黑色素的生成明显减少(P<0.05).结论:超临界二氧化碳联用分子蒸馏萃取的艾叶精油化学成分丰富,具有良好的抑菌、抗炎、酪氨酸酶活性抑制作用,值得深入研究其应用价值.
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