换一批hLMO4基因重组质粒的构建及蛋白表达和定位
Construction of Fusion Plasmid of Human LMO4 Gene and Its Recombinant Protein Expression and localization
摘要目的 构建hLMO4真核表达载体并证实融合蛋白在细胞内表达及定位.方法 提取人乳腺癌MCF-7细胞的mRNA.反转录为cDNA.PCR扩增hLMO4全长编码基因,亚克隆至pCDNA3.1-myc-his A表达载体中.将构建的重组质粒测序并转染到胃癌细胞BGC823中,提取细胞蛋白进行Western blot检测.利用共聚焦激光扫描显微镜观察pEGFP-LMO4在乳腺癌MCF-7细胞内定位.结果 hLMO4全长基因序列克隆到了真核表达载体pCDNA3.1-myc-his A中.酶切鉴定片段为500bp.Western blot检测到了融合蛋白表达,分子量约为23KD.pEGFP-LMO4在乳腺癌MCF-7细胞内定位以细胞核为主,在细胞浆内少量表达.结论 成功的构建了hLMO4全长基因真核表达载体,pEGFP-LMO4蛋白定位于乳腺癌细胞质和核内.
更多相关知识
分类号
R737.9（泌尿生殖器肿瘤）
栏目名称
发布时间
2009-05-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
国家自然科学基金（30370736、30570966）
高等学校博士学科点专项科研基金（20050159023）
- 浏览231
- 被引4
- 下载4
相似文献
- 中文期刊
- 外文期刊
- 学位论文
- 会议论文
