血脑屏障氧糖剥夺体外模型中缺氧诱导因子-1α的表达及血脑屏障通透性的变化

Effects of oxygen glucose deprivation on the hypoxia-inducible factor-1α expression and blood-brain barrier permeability in BBB model in vitro

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摘要目的研究血脑屏障氧糖剥夺体外模型中缺氧诱导因子-1α和紧密连接相关蛋白claudin-5的表达及血脑屏障通透性变化.方法提取纯化大鼠脑微血管内皮细胞,建立血脑屏障氧糖剥夺模型,模拟在体缺血,在氧糖剥夺不同时间点(0、30、60、120、240 min),应用EVOM测定仪测定培养的脑微血管跨内皮细胞内皮阻抗值,分析血脑屏障的通透性;应用辣根过氧化物酶渗漏实验分析血脑屏障的通透性;应用Westernblot法分析大鼠脑微血管内皮细胞的缺氧诱导因子-1α和紧密连接相关蛋白claudin-5的表达.结果与正常对照组相比,氧糖剥夺30 min,缺氧诱导因子-1 α表达增加,辣根过氧化物酶流量升高;氧糖剥夺60 min达峰值;氧糖剥夺120 min、240min,逐渐降低,但仍高于正常对照组.氧糖剥夺30 min,跨内皮阻抗值降低,claudin-5表达减少,在60 min最低;120 min、240min表达逐渐升高,但仍低于正常对照组.结论氧糖剥夺30 min至240min,缺氧诱导因子-1α和claudin-5表达及血脑屏障通透性改变明显,氧糖剥夺60 min达峰值.