miR-495-3p下调REGγ抑制甲状腺未分化癌细胞的生物学行为
miR-495-3p inhibits the biological behavior of anaplastic thyroid cancer cells by down-regulating REGγ
摘要目的 探究miR-495-3p对未分化甲状腺癌细胞体外增殖、迁移、侵袭和凋亡的影响,并进一步探究其下游靶基因REGγ在其中发挥的作用.方法 生物信息学预测REGγ mRNA 3'-UTR的miR-495-3p潜在结合位点,通过双荧光素酶报告基因实验验证二者结合.将miR-495-3p模拟物转染未分化甲状腺癌CAL-62细胞,分别采用RT-qPCR和Western blot检测细胞中REGγ mRNA和蛋白表达.将REGγ过表达质粒和miR-495-3p模拟物共转染未分化甲状腺癌CAL-62细胞,分别采用RT-qPCR和Western blot检测细胞中REGγ mRNA和蛋白表达;CCK-8法、Transwell实验和流式细胞术依次用于检测过表达REGγ对转染miR-495-3p模拟物的CAL-62细胞增殖活性、迁移和侵袭能力以及凋亡水平的影响.结果 REGγ mRNA 3'-UTR存在miR-495-3p的潜在结合位点,且miR-495-3p与REGγ mRNA 3'-UTR结合.转染miR-495-3p模拟物降低CAL-62细胞中REGγ mRNA和蛋白的表达,降低细胞增殖活性,抑制细胞迁移和侵袭能力并促进细胞凋亡.过表达REGγ增加转染miR-495-3p模拟物的CAL-62细胞中REGγ mRNA和蛋白的表达,增加细胞增殖活性,促进细胞迁移和侵袭能力,并抑制细胞凋亡.结论 miR-495-3p通过靶向抑制REGγ表达抑制未分化甲状腺癌细胞增殖、迁移和侵袭并诱导细胞凋亡.
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