换一批染色体数目异常自然流产胚胎有丝分裂关卡蛋白基因的研究
THE STUDY ON hsMAD2 GENE IN SPONTANEOUS ABORTION EMBRYOS WITH CHROMOSOMAL NUMERICAL ABNORMALITY
摘要目的 讨染色体数目异常自然流产胚胎中有丝分裂关卡蛋白(hsMAD2)基因的功能.方法 分别用定量PCR和Westarn blotting在mRNA和蛋白水平检测染色体数目异常(实验组)和正常(对照组)的自然流产胚胎组织中目的 基因的表达;构建针对hsMAD2基因的shRNA表达载体,抑制胚胎细胞内源性hsMAD2基因的表达.用Western blotting和定量PCR方法评价shRNA的干扰效果;用MTT法测定细胞增殖率;流式细胞术检测细胞周期.结果 hsMAD2蛋白在实验组中的表达显著低于对照组.shRNA的重组质粒表达载体能明显抑制胚胎细胞中hsMAD2基因的表达.胚胎细胞转染有效干扰质粒48 h后,细胞增殖抑制率达58%.有效干扰质粒引起G0/G1期和S期细胞的明显降低,G2/M期细胞增多. 结论 hsMAD2基因表达下调可能在染色体数目异常的自然流产胚胎发生中起着很重要的作用,为寻找可靠的临床检测指标奠定了基础.
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