换一批
换一批shRNAs介导的Smad2基因在小鼠成纤维细胞NIH/3T3中表达的沉默
THE SILENCE OF SHORT HAIRPIN RNAs INDUCED Smad2 IN NIH/3T3 FIBROBLAST CELLS
摘要目的 通过构建5个shRNA表达质粒,对转化生长因子β/Smads信号通路中受体调节性Smads蛋白中的Smad2的表达进行抑制.方法 针对鼠Smad2基因的mRNA序列,设计合成了5条shRNA-Smad2 DNA序列,分别插入至shRNA表达载体中,获得了5个shRNA-Smad2表达质粒,将shRNA表达质粒转染NIH/3T3细胞,采用半定量RT-PCR和Western blotting方法,检测shRNA表达质粒对Smad2表达的抑制效果.结果 编号为2.4的shRNA-Smad2表达质粒能够显著降低Smad2的表达,同时发现由不同的shRNA-Smad2表达质粒组成的RNAi池,产生的抑制效果比单个RNAi表达质粒的抑制效果明显提高.结论 成功地构建了特异、高效抑制Smad2表达的shRNA表达质粒.
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分类号
R813.3
栏目名称
论著
DOI
10.3321/j.issn:0529-1356.2008.05.010
发布时间
2008-11-26
基金项目
国家重点基础研究发展计划(973计划)
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