换一批
换一批不同年龄大鼠骨髓源性心肌干细胞生物学特性的比较
Comparative study on biological characteristics of marrow-derived cardiac stem cells from rats at different Ages
摘要目的 研究不同年龄大鼠骨髓源性心肌干细胞(MCSCs)形态和衰老相关指标的差异,探讨年龄因素对MCSCs增殖、存活和向心肌细胞分化的影响. 方法 利用单细胞克隆培养技术从幼年、成年和老年雄性SD大鼠骨髓中筛选MCSCs,透射电镜下观察细胞超微结构改变.SA-β-半乳糖苷酶染色和活性氧(ROS)染色检测细胞衰老变化,流式细胞术分析细胞周期分布.Annexin V/PI双标流式细胞术和Hochest33342染色检测细胞存活和凋亡.用骨形态发生蛋白-2(BMP-2)诱导不同年龄组MCSCs向心肌细胞分化,通过RT-PCR检测诱导后心肌早期转录因子和心肌特异基因的表达,并通过免疫细胞化学染色检测各年龄组细胞经(BMP-2)诱导后细胞内心肌特异性肌钙蛋T(cTnT)表达的变化. 结果 老年组MCSCs核质比减小,胞质内可见髓样小体.随着年龄增长,处于增殖期的MCSCs比例下降,β-半乳糖苷酶和ROS阳性细胞数目增多.老年组存活细胞比例较幼年组降低.用BMP-2诱导后4周,幼年组细胞的Nkx2.5、GATA-4和cTnT、Cx-43 mRNA表达明显,成年组和老年组细胞表达低于幼年组,差异有显著性意义.免疫细胞化学染色显示,BMP-2诱导后幼年组细胞cTnT表达明显,老年组细胞表达较弱. 结论 随着年龄增长MCSCs发生衰老变化,其增殖、存活和向心肌细胞分化能力逐渐下降.
更多相关知识
关键词
骨髓源性心肌干细胞衰老骨形态发生蛋白-2细胞分化β-半乳糖苷酶活性氧流式细胞术Marrow-derived cardiac stem cellsAgingBMP-2Cell differentiationβ-galactosidaseReactive oxygen speciesFlow cytometry
栏目名称
DOI
10.3969/j.issn.0529-1356.2009.04.011
发布时间
2009-09-23
基金项目
国家自然科学基金（30470883）；
高等学校博士学科点专项科研基金（200802460044）
- 浏览235
- 被引1
- 下载9
相似文献
- 中文期刊
- 外文期刊
- 学位论文
- 会议论文
