影响高龄小鼠卵母细胞质量的超微结构因素

Ultrastructural factors affecting the quality of oocytes in aged mice

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摘要目的探讨高龄小鼠卵母细胞线粒体、皮质颗粒、微丝、纺锤体及染色体形态和排布的变化规律.方法将雌性昆明小鼠分为年轻组(4～8周)和高龄组(48 ～ 52周).腹腔内注射孕马血清促性腺激素(PMSG) 10IU/只行促排卵,48 h后腹腔内注射人绒毛膜促性腺激素(hCG)10 IU/只,14 h后收集输卵管的卵冠丘复合物(OCCC).脱去颗粒细胞,获取成熟卵母细胞(MⅡ期)经2％多聚甲醛固定.抗小鼠α-tubulin单克隆抗体染色卵母细胞纺锤体的微管,罗丹明标记的鬼笔环肽染色微丝,FITC结合的小扁豆凝集素染色皮质颗粒,Mito TrackerGreen FM染色线粒体.激光扫描共焦显微镜下观察.结果共获取小鼠卵母细胞372枚,其中年轻组179枚,高龄组193枚.高龄组小鼠卵母细胞纺锤体异常率(71.78％±1.27％)、染色体排列异常率(65.16％±1.52％)明显高于年轻组(18.93％±1.27％,32.24％±1.10％)(P＜0.01,P＜0.01);高龄组小鼠卵母细胞线粒体的荧光强度(28.09±6.62)明显低于年轻组(45.07±5.90) (P ＜0.01);高龄组小鼠成熟皮质颗粒(Ⅲ级皮质颗粒)(51.00％±1.00％)明显低于年轻组(94.04％±0.71％)(P＜0.01).结论高龄小鼠卵母细胞中各主要细胞器、细胞骨架及染色体排列异常率明显增加,可能是导致高龄受孕率低的重要原因.