换一批
换一批核因子E2相关因子2对人永生化角质形成细胞氧化损伤的保护作用
Protective effect of nuclear factor E2-related factor 2 on oxidative injury in human immortalized epidermal cells
摘要目的 探讨核因子E2相关因子2(Nrf2)对过氧化氢(H2O2)诱导的人永生化角质形成细胞(HaCaT)氧化损伤的保护作用.方法 用慢病毒转染方式使HaCaT过表达Nrf2(Nrf2/HaCaT),并用MTT法和抗Ki67免疫荧光染色法检测其增殖活性.实验分为Nrf2/HaCaT组和HaCaT组,每组5个样本.应用200 μmol/LH2O2处理两组细胞24 h以诱导氧化损伤,并用MTT法检测细胞活性,乳酸脱氢酶(LDH)法检测细胞损伤情况,TUNEL染色检测细胞凋亡,ELISA法和比色法检测氧化应激相关指标Nrf2、谷胱甘肽(GSH)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)和活性氧(ROS),以及炎症相关因子白细胞介素(IL)-6、肿瘤坏死因子(TNF)-α、核因子κB(NF-κB) P65的含量.结果 Nrf2/HaCaT细胞增殖活性显著高于HaCaT(P＜0.05).经H2O2诱导后,Nrf2/HaCaT活性较HaCaT高(P＜0.05),LDH释放及凋亡率较HaCaT低(P＜0.05),其上清液中的抗氧化物Nrf2、GSH和SOD水平较HaCaT高(P＜0.05),而氧化产物ROS、MDA以及炎症因子IL-6、TNF-α和NF-κB P65水平较HaCaT低(P＜0.05).结论 Nrf2过表达可促进HaCaT增殖及减轻H2O2诱导的细胞氧化和炎性损伤.
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分类号
R758.1
栏目名称
DOI
10.16098/j.issn.0529-1356.2021.02.010
发布时间
2021-04-30
基金项目
四川省教育厅科研重点项目（16ZA0195）；
泸州市人民政府-西南医科大学科技合作项目[2015LZCYD-S05（7/12）
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