长链非编码RNA alpha-2-巨球蛋白反义RNA 1靶向微小RNA-106b-5p调控氧化型低密度脂蛋白诱导的人脑微血管内皮细胞损伤

Long non-coding RNA alpha-2-macroglobulin antisense RNA 1 regulating oxidized low density lipoprotein-induced human brain micro vascular endothelial cell damage by targeting microRNA-106b-5p

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摘要目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)alpha-2-巨球蛋白反义RNA 1(A2M-AS1)靶向微小RNA(miR)-106b-5p对氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的人脑微血管内皮细胞损伤的影响.方法用ox-LDL诱导人脑微血管内皮细胞设为ox-LDL组,正常培养细胞为对照(Ctrl)组;A2M-AS1过表达(pcDNA-A2M-AS1组)、空载体(pcDNA 组)、miR-106b-5p 抑制剂(anti-miR-106b-5p 组)、阴性对照(anti-miR-NC 组)、pcDNA-A2M-AS1 与对照mimic NC(miR-NC 组)、pcDNA-A2M-AS1 与 miR-106b-5p 模拟物(miR-106b-5p mimics 组)转染细胞后加 ox-LDL 处理,n=9;Real-time PCR检测A2M-AS1与miR-106b-5p表达;试剂盒检测丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)水平;流式细胞术及TUNEL法检测细胞凋亡;双荧光素酶报告基因实验检测A2M-AS1与miR-106b-5p靶向关系;Western blotting检测Bcl-2和Bax蛋白表达量.结果与Ctrl组比较,ox-LDL组A2M-AS1表达水平、SOD和CAT活性、Bcl-2蛋白水平降低,miR-106b-5p表达水平、MDA水平、凋亡率、Bax蛋白水平升高(P＜0.05);过表达A2M-AS1或干扰miR-106b-5p降低ox-LDL诱导细胞后MDA水平、凋亡率与Bax蛋白水平,升高SOD、CAT 活性和 Bcl-2 蛋白水平(P＜0.05);A2M-AS1 靶向 miR-106b-5p;上调 miR-106b-5p 逆转过表达 lncRNA A2M-AS1对ox-LDL诱导的人脑微血管内皮细胞损伤的作用.结论 A2M-AS1通过靶向miR-106b-5p减轻ox-LDL诱导的人脑微血管内皮细胞损伤.