微小RNA-103a-3p通过肿瘤蛋白53调控凋亡抑制剂1/P53对骨质疏松症的影响

Effects of microRNA-103a-3p on osteoporosis through tumor protein 53-regulated inhibitor of apoptosis 1/P53

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摘要目的探讨微小RNA(miR)-103a-3p调控细胞肿瘤蛋白 53 调控凋亡抑制剂 1(TRIAP1)对成骨细胞分化以及去卵巢小鼠骨量的影响.方法 MC3T3-E1 细胞分为正常对照(NC)组、miR-103a-3p-NC组、miR-103a-3p模拟(mimc)组、miR-103a-3p mimic+TRIAP1-NC组、miR-103a-3p mimic+TRIAP1 mimic组.Real-time PCR检测细胞miR-103a-3p、TRIAP1、P53 的mRNA表达,MTT法和流式细胞术检测细胞增殖及凋亡,免疫荧光染色和茜红素染色检测细胞骨架F-actin表达和矿化情况,ELISA检测细胞碱性磷酸酶(ALP)活性.24 只雌性小鼠设为sham组、骨质疏松症(OP)组、miR-103a-3p antagonist-NC组和miR-103a-3p antagonist组,每组 6 只摘取双侧卵巢制备OP模型,sham组仅分离卵巢组织周围脂肪.测定骨组织miR-103a-3p、TRIAP1、P53、ALP、骨钙素(OCN)、骨桥蛋白(OPN)的mRNA表达,microCT测定骨密度(BMD)、骨矿物质含量(BMC),HE染色观察骨组织病理改变.结果细胞转染miR-103a-3p mimic后,miR-103a-3p及P53 表达升高、TRIAP1 表达降低,细胞增殖降低、凋亡增加,F-actin表达减弱,钙结节数量减少,ALP活性降低(P<0.01);而在增加转染TRIAP1 mimic后,以上miR-103a-3p mimics导致的结果均得到显著逆转(P<0.01).OP组小鼠骨组织miR-103a-3p、P53 表达升高,TRIAP1、ALP、OCN、OPN基因表达降低,BMD、BMC降低,骨组织结构破坏(P<0.05);miR-103a-3p antagonist组小鼠骨组织miR-103a-3p及P53 表达降低,TRIAP1、ALP、OCN、OPN基因表达升高,BMD、BMC升高,骨组织结构改善(P<0.05).结论 MiR-103a-3p可介导TRIAP1/P53 抑制成骨细胞增殖及矿化,而miR-103a-3p拮抗治疗可减少OP小鼠骨量丢失.