换一批中性粒细胞对永久缺血性脑卒中小胶质细胞极化的调控作用
Regulatory effect of neutrophils in microglial polarization after permanent ischemic stroke
摘要目的 在永久缺血性脑卒中小鼠模型上,探讨外周血中性粒细胞浸润对大脑原位小胶质细胞的极化调控.方法 取58只C57BL/6小鼠,分为假手术组和模型组,对模型组小鼠实施永久性大脑中动脉阻塞手术.术后48 h、7 d、14 d和30 d处死小鼠,灌注取材.Western blotting检测脑组织中M1型小胶质细胞标志物CD16、M2型标志物精氨酸酶1(Arg1)、炎症因子白细胞介素-1β(IL-1β)及中性粒细胞标志物髓过氧化物酶(MPO)的水平.免疫荧光法检测脑切片梗死区周围中性粒细胞浸润及M2型小胶质细胞分布.在体外实验中,将分离纯化的中性粒细胞与小胶质细胞BV2共培养,脂多糖刺激后,观察BV2吞噬中性粒细胞的情况,并检测共培养后BV2细胞CD16和Arg1蛋白的表达水平.结果 Western blotting显示,小鼠术后脑组织中CD16(P＜0.05)、IL-1β(P＜0.001)和MPO(P＜0.05)的水平在48 h和7 d显著增高,随后下降,MPO于术后30 d恢复正常.免疫荧光显示,小鼠大脑皮层梗死区周围的MPO阳性细胞在术后48 h显著增加(P＜0.001),随后降低(P＜0.05).小胶质细胞标志物离子钙结合适配分子1(Iba1)和MPO双阳性细胞在术后逐渐增多,14 d达到最高(P＜0.05),Iba1和Arg1双阳性细胞也在术后7 d(P＜0.05)和14 d(P＜0.01)显著上升.体外共培养显示,BV2吞噬中性粒细胞后,CD16显著下降(P＜0.05),Arg 1显著上调(P＜0.05).结论 在永久缺血性脑卒中小鼠模型中,小胶质细胞吞噬中性粒细胞后从M1型向M2型转变,损伤脑区由促炎转变为抗炎状态.
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关键词
缺血性脑卒中小胶质细胞中性粒细胞M1/M2极化神经炎症免疫印迹法免疫荧光C57BL/6小鼠Ischemic strokeMicrogliaNeutrophilM1/M2 polarizationNeuroinflammationWestern blottingImmunofluorescenceC57BL/6 mouse
栏目名称
DOI
10.16098/j.issn.0529-1356.2025.02.002
发布时间
2025-04-25（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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