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掺钆羟基磷灰石复合兔脂肪间充质干细胞修复膝关节软骨缺损

Repair of knee joint cartilage defects in rabbits using Gd-HA composite with adipose-derived mesenchymal stem cells

摘要目的 探讨掺钆羟基磷灰石(Gd-HA)支架材料复合脂肪间充质干细胞(ADSCs)对膝关节软骨缺损的修复作用.方法 分离、培养和鉴定兔ADSCs,建立兔膝关节全层软骨缺损模型,18 只兔随机分成空白对照组、Gd-HA支架组和ADSCs+Gd-HA支架组.术后 12、24 周取材行大体观察及评分(ICRS),HE、甲苯胺蓝、改良番红O亮绿和Ⅱ型胶原(ColⅡ)免疫组织化学染色分析及组织学染色评分(O'Driscoll),Real-time PCR检测修复组织ColⅡ与糖胺聚糖(GAG)mRNA 表达量,Western blotting 检测修复组织 ColⅡ蛋白表达,二甲基亚甲蓝比色法(DMMB)检测GAG含量,压痕实验检测生物力学强度,PKH26 标记的ADSCs示踪,评价Gd-HA复合ADSCs的组织工程支架对兔膝关节软骨缺损的修复效果.结果 体外分离培养的ADSCs形态学观察生长良好,表型稳定,定向分化良好.大体观察及组织学染色可见,植入Gd-HA支架组的膝关节全层软骨缺损模型修复程度及修复效果均优于空白对照组,而ADSCs+Gd-HA支架组的软骨修复情况优于Gd-HA支架(P<0.05);ICRS和改良O'Driscoll评分均高于其他两组(P<0.05).与Gd-HA组相比,ADSCs+Gd-HA组关节软骨修复过程中可产生更多的ColⅡ、GAG,其修复组织的力学强度表现更强(P<0.05);ADSCs+Gd-HA组修复组织内发现PKH26 标记的ADSCs,且参与新生组织的组成.结论 Gd-HA支架材料复合ADSCs对膝关节全层软骨缺损具有良好的修复效果,可能成为生物学修复关节软骨缺损的新型材料.

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解剖学报

解剖学报

2025年56卷3期

342-350页

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