Dysbindin-1缺失对小鼠睾丸组织来源的外泌体的影响
Effect of dysbindin-1 deletion on exosomes derived from mouse testicular tissue
摘要目的 比较野生型(WT)小鼠和dysbindin-1缺失突变的sdy小鼠睾丸组织来源的外泌体的差异,探讨dysbindin-1在睾丸组织来源的外泌体形成中的可能作用.方法 1.用蔗糖超速离心法分离WT小鼠和sdy小鼠睾丸组织来源的外泌体,免疫印迹法分析外泌体蛋白的表达,透射电子显微镜负染法观察外泌体的形态,动态光散射粒径分析仪分析颗粒大小分布,质谱分析外泌体的蛋白内容物.2.用磁珠免疫纯化获得CD63+外泌体,进行蛋白组分鉴定,并选取keratin5(krt5)蛋白进行验证.结果 Dysbindin-1缺失不影响外泌体的形态、数量,但外泌体标记物CD63表达降低.与WT小鼠相比,sdy小鼠睾丸组织的外泌体高表达159种蛋白,低表达209种蛋白,特异性表达184种蛋白.睾丸组织CD63+外泌体中共筛选到12个蛋白,选取krt5蛋白,显示该蛋白与dysbindin-1有相互作用,并发现dysbindin-1缺失后小鼠睾丸组织来源的外泌体中krt5的表达减少.结论 Dysbindin-1缺失不影响睾丸组织来源的外泌体的形态和数量,但影响外泌体蛋白的种类和含量,dysbindin-1可能通过蛋白相互作用的方式影响外泌体蛋白的转运.
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