外侧臂旁核痛和痒特异性神经元的形态学特征
Morphological features of pain-and itch-specific neurons in the lateral parabrachial nucleus
摘要目的 探讨外侧臂旁核(LPB)中痛觉和痒觉特异性神经元的分布特征及其下游投射通路差异.方法 使用雄性C57BL/6小鼠,通过预实验(n=24)确定四环素抑制性基因表达系统(Tet-off)的最佳诱导时间窗为7 d,随后采用Tet-off系统,结合c-Fos启动子驱动的病毒载体及Fos蛋白免疫荧光染色技术,特异性标记LPB中痛觉(LPBpain)或痒觉(LPBitch)激活的神经元,并分析LPB不同亚核内LPBpain与LPBitch的共标情况(n=7);利用Tet-off技术结合病毒顺行示踪技术,观察并分析LPBpain和LPBitch神经元下游投射靶区差异(n=6).结果 在不同时间窗内先后给予两种不同伤害性刺激可诱发LPB内大量的绿色荧光蛋白标记的病毒以及红色荧光蛋白标记的Fos表达;荧光显微镜下可见LPBpain和LPBitch神经元在LPB的外侧亚核(LPBE)大量共存,增强绿色荧光蛋白(EGFP)标记的痛神经元和Fos(红色)标记痒神经元共标率可达72.9%,EGFP(绿色)标记的痒神经元和Fos(红色)标记痛神经元共标率可达79.5%,而其他亚核共标率相对较低;顺行示踪结果显示,LPBpain和LPBitch神经元均主要投射至中央杏仁核(CeA)、中脑导水管周围灰质(PAG)、未定带(ZI)等脑区,总体投射模式高度相似.结论 LPB可以同时被痛和痒刺激激活,但不同亚核对痛、痒的处理方式有差异;LPBpain和LPBitch下游投射脑区基本重叠,提示中枢神经系统内痛/痒差异编码可能更多地通过分子差异而非通路差异完成.
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