摘要目的 以电穿孔法转染COS-7细胞系以得到较高的转染率。方法 以CMV/LacZ质粒转化COS-7细胞系,48小时后用X-gal染色。观察不同的穿孔电压(600V,550V,500V,450V,400V)、时间常数(40us、100us)、操作温度(室温,4℃)、质粒浓度(5us/ml,25us/ml)和细胞悬液体积(200ul、400ul)对转染率的影响。结果 利用Eppendorf公司的Multiporator及低渗透压缓冲液转化COS-7细胞的最优条件是:转化体积400μl,细胞密度2×106 cells/ml,场强2000V/cm,时间常数100us,室温质粒浓度25μg/ml。条件优化后COS-7转染率可达85%。结论 优化的电穿孔法可得到较高的COS-7转染率。
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