换一批
换一批摘要目的 探讨E2F1对小脑颗粒神经元死活的影响及机制.方法 构建表达质粒pcDNA-E2F1(pE2F1)及突变体pcDNA-E2F1-m132(pm132),转染293细胞验证表达,转染小脑颗粒神经元用6×E2F-1uciferase报道基因检测转录活性.转染神经元24 h或48 h后Hoechst 33258核染色,统计转染pE2F1及pm132神经元(GFP阳性细胞)的核固缩率(即凋亡率);或者转染48 h后进行25K、5K处理12hr,统计凋亡率.结果 构建质粒表达E2F1及突变体E2F1-m132成功,E2F1具有转录活性而E2F1-m132没有;表达E2F1及E2F1-m132均未诱导神经元凋亡(P>0.05);表达E2F1抑制5K诱导的神经元凋亡(P<0.05),而E2F1-m132没有抑制效应.结论 E2F1抑制神经元凋亡依赖其转录活性.
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