换一批CaMKⅡ活性对H2 O2所致SK-N-SH细胞氧化应激损伤的影响
Effect of CaMKⅡ on oxidative stress-dependent impairment induced by H2 O2 in SK-N-SH cells
摘要目的:评价钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ(CaMKⅡ)活性对过氧化氢所致人源性神经母细胞瘤细胞氧化应激损伤的影响.方法:SK-N-SH细胞生长至对数期时,接种于96孔培养板或6孔培养板,采用随机数字表法,将其分为4组:正常对照组,培养基中添加H2 O2组(H2 O2组),培养基中只添加CaMKⅡ活性抑制剂KN93组(KN93组),培养基中同时添加H2 O2和KN93组(H2 O2+KN93组),倒置显微镜观察细胞形态学,采用CCK-8法测定细胞活力,采用Fura-2/AM荧光法检测细胞内Ca2+浓度([Ca2+]i),采用免疫印迹测定CaMKⅡ和磷酸化CaMKⅡ的表达,采用RT-PCR法检测CaMKⅡmRNA表达.结果:与正常对照组比较,H2 O2组细胞体呈圆形的细胞和脱落细胞增加,细胞突起长度缩短,细胞存活率降低,[Ca2+]i升高,磷酸化CaMKⅡ表达上调,CaMKⅡmRNA表达下调.与H2 O2组比较,H2 O2+KN93组脱落细胞明显减少,突起变长,细胞存活率增加,[Ca2+]i降低,磷酸化CaMKⅡ表达下调,CaMKⅡmRNA表达水平上调.结论:CaMKⅡ增强了H2 O2诱导的人源性神经母细胞瘤细胞氧化应激损伤.
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关键词
过氧化氢氧化应激钙钙调蛋白依赖性蛋白激酶2型神经母细胞瘤H2 O2oxidative stresscalcium-calmodulin-dependent protein kinase type 2neuroblastoma
栏目名称
DOI
10.3969/j.issn.1001-1633.2017.05.009
发布时间
2017-11-06（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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