基于酶切探针等温扩增技术快速检测汉坦病毒S4亚型方法的建立
RAPID DETECTION METHOD OF HANTAVIRUS SEOV-S4 BASED ON ENZYMATIC PROBE ISOTHERMAL AMPLIFICATION
摘要汉坦病毒(hantavirus,HV)属汉城病毒S4 亚型(Seoul virus-S4 subtype,SEOV-4)是东南沿海地区的主要 HV 流行亚型,目前尚缺乏快速诊断检测方法.本研究基于酶切探针等温扩增技术(Enzymatic Probe Isothermal Amplification,EPIA),以 SEOV-S4 较为保守的 S序列为靶序列设计引物和探针,建立了一种快速检测 SEOV-S4 的方法.用靶基因合成质粒梯度稀释进行灵敏度和重复性验证,并用人源其他亚型HV 进行特异性验证,结果显示,基于EPIA的SEOV-S4 检测方法灵敏度可以达到 10 copies/μL,且与人源其他亚型 HV 无交叉反应.结果表明,本研究建立的检测方法具有良好的敏感性、特异性和重复性,可用于相关样本的诊断与筛查.
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