换一批免疫荧光技术中不同固定剂对RhoA蛋白定位的影响
Effect of different fixatives on location of RhoA protein by immunofluorescence microscopy
摘要目的: 观察免疫荧光技术中不同固定剂对SGC7901细胞中RhoA蛋白定位的影响,找出最适合观察RhoA蛋白细胞内定位的固定方法. 方法: 采用免疫荧光的方法观察在使用不同固定剂(2%多聚甲醛,4%甲醛,甲醇,丙酮,10%三氯醋酸)及0.3%TritonX-100穿孔的条件下,RhoA蛋白在SGC7901细胞中的定位.结果: 用2%多聚甲醛固定,不用0.3%TritonX-100时,染色显示胞质内可见少量RhoA蛋白散在分布,核内则有RhoA蛋白浓聚;用0.3%TritonX-100后,质内只能见极少量阳性染色,核内蛋白染色变得清晰.甲醛固定后染色显示RhoA蛋白主要在核内分布,使用TritonX-100后染色更为清楚.甲醇和丙酮固定后染色显示RhoA蛋白主要在胞质内分布,核内基本未见阳性分布,加TritonX-100后核内染色增强,胞质染色减弱.另外,使用10%三氯醋酸固定未加TritonX-100时染色较淡,胞质胞核都可见,加TritonX-100后核内可见蛋白浓聚,胞质染色减少.结论: 用免疫荧光法观察RhoA定位时,固定剂的不同以及是否加TritonX-100对观察RhoA蛋白细胞内定位具有较大的影响.
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分类号
R735（消化系肿瘤）
栏目名称
DOI
10.3969/j.issn.1671-7783.2006.05.004
发布时间
2006-11-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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